产品简介

【中文名称】AF532标记的重组蛋白A/B，AF532偶联重组蛋白A/B，重组蛋白A/B,AF532偶联物

【英文名称】AF532-Protein A/B，Alexa Fluor 532-Protein A/B，AF532-Recombinant Protein A/B，Recombinant Protein A/B, AF532 conjugate

基础参数

【中文名称】AF532标记的重组蛋白A/B，AF532偶联重组蛋白A/B，重组蛋白A/B,AF532偶联物

【英文名称】AF532-Protein A/B，Alexa Fluor 532-Protein A/B，AF532-Recombinant Protein A/B，Recombinant Protein A/B, AF532 conjugate

【产品纯度】≥95%

【最大吸收波长】532 nm

【最大发射波长】554 nm

【储存条件】2-8℃避光密封，避免反复冻融，添加0.02%叠氮钠作为抑菌剂

【用途】科研级橙黄通道高亮度重组抗体结合荧光标记试剂

产品介绍

AF532-Protein A/B，Alexa Fluor 532-Protein A/B，AF532-Recombinant Protein A/B

AF532-Protein A/B是将经过基因工程优化的重组蛋白A、蛋白B核心功能域融合后，通过低损伤定点偶联技术共价连接AF532高亮度橙黄荧光基团制备的特色试剂。它完整保留了对多物种IgG Fc段的广谱高亲和力，同时通过序列编辑去除了天然蛋白的非特异性结合位点，搭配AF532适配532 nm标准激光线的特性，可直接适配绝大多数共聚焦显微镜、流式细胞仪的橙黄检测通道，在多色荧光成像中作为中间通道使用，能有效避开常见绿色与红色荧光的光谱串扰，是多标免疫荧光、亚细胞结构共定位、高灵敏度流式检测场景的高亮度特色工具试剂。

作用机理

AF532-Protein A/B的重组融合功能结构域，可精准识别并结合不同物种IgG分子Fc段的保守结合区域，全程不干扰抗体Fab端的抗原识别活性。通过蛋白表面非活性区域定点引入的AF532荧光基团，在532 nm标准激光激发下，可稳定发射554 nm的高亮度橙黄特征荧光，该波段处于绿色荧光与红色荧光的光谱间隙，和AF488、AF647等常见荧光基团的串扰率低于6%，大幅降低多色检测时的信号补偿难度。重组优化后的蛋白骨架，相比天然蛋白A/B的随机偶联产物，非特异性背景吸附降低83%，AF532染料的抗光漂白性能远超传统Cy3类染料，连续激光照射30分钟后荧光信号保留率仍高于87%。

性能参数与竞品对比

相较于传统Cy3标记的Protein A/B，该试剂的抗光漂白性能提升1.8倍，不易在长时间共聚焦多层扫描中出现信号淬灭，多色成像的稳定性大幅提升。它的生理缓冲液稳定性优异，在pH 6.5-8.0的细胞培养体系中37℃放置24小时，抗体结合活性与荧光亮度几乎无损失，远高于普通随机偶联的橙黄荧光蛋白试剂，后者在相同条件下12小时内就会出现明显的染料聚集与活性下降。和同类型其他品牌的AF532-Protein A/B产品相比，该试剂的标记位点均位于蛋白非活性区域，几乎不会影响蛋白与IgG的结合效率，抗体捕获活性提升35%以上。

应用领域

可用于多色共聚焦成像的亚细胞结构共定位，将该试剂与针对靶标蛋白的一抗预结合，搭配AF488标记的微管蛋白抗体、AF647标记的细胞核染料，即可实现三种亚细胞结构的同步清晰成像，橙黄通道的信号几乎不会和另外两个通道发生光谱串扰，无需复杂的信号拆分即可得到高对比度的共定位结果。可用于稀有细胞群的高灵敏度流式检测，依托AF532的高亮度特性，对低表达量的膜蛋白进行染色时，阳性群与阴性群的信号分离度比普通Cy3标记试剂提升近1倍，能更精准地分选出目标稀有细胞亚群。也可用于Western Blot的多靶标同步显影，将该试剂与对应一抗结合后孵育转印膜，搭配AF488、AF647标记的配对试剂，可在同一张膜上同时完成三个不同分子量靶标的荧光显影，无需反复 stripping 重孵育，大幅提升实验效率。

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（本篇图文信息由西安强化生物科技xw整理！本试剂仅限于科研实验用途！）