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产品简介
【中文名称】AFDye 555 琥珀酰亚胺酯、AFDye 555 活性酯【英文名称】AFDye 555 NHS Ester、AFDye 555 Succinimidyl Ester、AFDye 555 SE
基础参数
【中文名称】AFDye 555 琥珀酰亚胺酯、AFDye 555 活性酯
【英文名称】AFDye 555 NHS Ester、AFDye 555 Succinimidyl Ester、AFDye 555 SE
【产品纯度】≥95%
【外观性状】固体/粉末
【储存条件】-20℃以下避光干燥保存,惰性气体保护
【用途】试剂仅用于科研实验
【来源】西安强化生物科技
产品介绍
AFDye 555 NHS Ester、AFDye 555 Succinimidyl Ester、AFDye 555 SE
AFDye 555 NHS Ester是一种高性能橙红色荧光胺反应性标记试剂,由高性能荧光染料AFDye 555与N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)活性基团共价连接而成,光谱特性等同于Alexa Fluor® 555 NHS Ester。该试剂激发波长555 nm、发射波长565 nm,可使用488 nm或532 nm激光谱线激发,在pH 4-10范围内保持稳定荧光输出,不受酸碱环境干扰。其核心结构中的四磺酸基团赋予分子的水溶性,有效避免蛋白疏水化聚集沉淀的风险——这是相较于传统Cy3和四甲基罗丹明的本质优势。NHS酯形式使其可直接与蛋白质、抗体、多肽等生物分子表面的伯胺基团偶联,操作简洁高效。
作用机理
NHS酯基团在pH 7.0-9.0的弱碱性条件下,与蛋白质、多肽、抗体表面的伯胺基团(赖氨酸ε-氨基或N端α-氨基)发生亲核取代反应,释放N-羟基琥珀酰亚胺,同时形成稳定的酰胺键共价连接。该反应选择性高,不与巯基、羟基或羧基发生交叉反应。对于免疫球蛋白IgG等大多数抗体,摩尔吸光系数约为203,000 cm⁻¹M⁻¹,推荐F/P值(染料/蛋白摩尔比)控制在4-9之间。标记效率可通过公式计算:蛋白摩尔浓度 = (A280 − A555 × 0.08) × 稀释倍数 / 203000;F/P = A555 × 稀释倍数 / (150000 × 蛋白摩尔浓度)。

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