AZDye 430 NHS Ester，多色流式与超分辨显微镜的理想探针

更新时间：2026-07-14

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基础参数

【中文名称】AZDye 430 琥珀酰亚胺酯 / AZDye 430 活性酯

【英文名称】AZDye 430 NHS Ester / AZDye 430 SE / AZDye 430 Succinimidyl Ester

【分子式】C₃₆H₃₉N₃O₁₁S

【分子量】600.56

【产品纯度】≥95% (HPLC)

【外观性状】橙黄色固体粉末

【储存条件】-20℃避光干燥密封保存

【用途】生物大分子荧光标记、多色流式检测、超分辨成像

【来源】西安强化生物科技

产品介绍

文章配图-1

AZDye 430 NHS Ester是一款专为405/407 nm紫激光线设计的绿色荧光NHS酯标记试剂。其激发波长430 nm、发射波长539 nm，呈现明亮的绿色荧光，与AF430光谱高度一致，可直接替代使用。

该试剂以荧光团为核心，搭配NHS活性酯基团，在弱碱性条件下即可与生物分子中的伯胺高效偶联——开瓶即用，无需额外活化。高水溶性确保标记后偶联物在水相中稳定存在，不易聚集沉淀。

作用机理

NHS酯基团在pH 7.5–8.5条件下与蛋白质赖氨酸ε-氨基或N端α-氨基发生亲核取代反应，生成稳定的酰胺键，同时释放N-羟基琥珀酰亚胺。反应快速、专一，不需要催化剂，水相缓冲液中即可完成。

标记后的偶联物在430 nm激发下发射539 nm绿色荧光，量子产率高，信号明亮。该染料pH 4–10范围内荧光强度稳定，从酸性溶酶体到中性胞质，信号不衰减。

性能参数与竞品对比

AZDye 430 NHS Ester的核心优势可以用三个字概括：亮、溶、稳。

亮度：消光系数约15,000 cm⁻¹M⁻¹，量子产率约0.70，标记后信号强度显著优于传统AMCA和Coumarin 343，检测灵敏度直接拉满。

水溶性：高水溶性意味着可以使用更高的染料-蛋白比而不发生沉淀，获得更均一、更明亮的偶联产物。高摩尔比下不易发生显著自猝灭，可标记更多染料分子，灵敏度更高。

光谱兼容性：激发430 nm / 发射539 nm，与DAPI/Hoechst（蓝）、Cy3/AF594（红）光谱分离度。斯托克斯位移约110 nm，有效降低样本自发荧光背景，多色实验中无需复杂补偿。

与AF430相比，AZDye 430性价比更优；与DyLight 430相比，光稳定性更突出；与传统染料相比，pH不敏感性和水溶性是最大的实用优势。

应用领域

多色流式细胞术：配合405 nm激光器标记抗体，检测细胞表面或胞内靶标，扩展同时检测通道数。绿色通道与PE、APC几乎无光谱重叠，补偿矩阵简洁。

超分辨显微成像：光物理特性适配STORM等单分子定位技术，提供高解析度细胞结构图像，是随机光学重建显微镜的理想选择。

免疫荧光与共聚焦成像：标记抗体后用于细胞内蛋白定位，pH 4-10信号稳定，从固定细胞到活细胞成像均可胜任。与DAPI、Cy3组合，三色共定位实验干净利落。

核酸标记：通过胺基修饰的寡核苷酸探针，实现荧光原位杂交（FISH），定位染色体或RNA分布。

Western Blot荧光检测：标记一抗或二抗，替代传统HRP显色体系，实现多通道同时检测，灵敏度与特异性兼顾。