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AZDye 568 NHS Ester,偶联物在578 nm激发下发射602 nm橙红色荧光

更新时间:2026-07-14点击次数:11

基础参数

【中文名称】AZDye 568 琥珀酰亚胺酯 / AZDye 568 活性酯

【英文名称】AZDye 568 NHS Ester / AZDye 568 SE / AZDye 568 OSu / AZDye 568 Succinimidyl Ester

【分子量】791.8

【产品纯度】≥95% (HPLC)

【外观性状】固体

【储存条件】-20℃干燥避光密封保存

【用途】生物大分子荧光标记、多色流式检测、超分辨成像

【来源】西安强化生物科技

文章配图-1

产品介绍

AZDye 568 NHS Ester是一款专为568 nm激光线设计的橙色荧光NHS酯标记试剂,为Alexa Fluor 568 NHS Ester的等同替代产品。激发波长578 nm,发射波长602 nm,呈现明亮的橙红色荧光,与AF568光谱高度一致,可直接替代使用。

该试剂以NHS活性酯形式提供,开瓶即可与蛋白质赖氨酸ε-氨基或N端α-氨基高效偶联——无需额外活化,无需催化剂,在弱碱性缓冲液中即完成共价标记。高水溶性确保标记后偶联物在水相中稳定存在,不易聚集沉淀。

作用机理

NHS酯基团在pH 7.2–8.0条件下与生物分子中的伯胺(蛋白质赖氨酸ε-氨基、N端α-氨基、胺基修饰寡核苷酸)发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键,同时释放N-羟基琥珀酰亚胺。

反应快速、专一、副产物少。标记后的偶联物在578 nm激发下发射602 nm橙红色荧光,量子产率高,信号明亮。该染料在pH 4至10范围内荧光强度稳定,从酸性溶酶体到中性胞质,信号不衰减。

性能参数与竞品对比

AZDye 568 NHS Ester的核心优势集中在四个维度:

亮度:摩尔消光系数约88,000 cm⁻¹M⁻¹,量子产率约0.82,标记后信号强度显著优于传统TAMRA和磺化Cy3,检测灵敏度直接拉满。

光稳定性:抗光漂白能力远超TAMRA和PE,长时间共聚焦成像或多轮流式扫描中信号衰减极小,适合需要反复检测的实验场景。

水溶性:高水溶性意味着可以使用更高的染料-蛋白比而不发生沉淀,获得更均一、更明亮的偶联产物。高摩尔比下不易发生显著自猝灭,灵敏度更高。

光谱兼容性:激发578 nm / 发射602 nm,与FITC/AF488(绿)、APC/Cy5(红)光谱分离良好。斯托克斯位移约24 nm,橙色通道与绿色、红色通道几乎无重叠,多色实验中补偿矩阵简洁。

与AF568相比,AZDye 568性价比更优;与TAMRA相比,光稳定性和水溶性全面胜出;与磺化Cy3相比,分子量更小,标记后对蛋白活性影响更低。

应用领域

多色流式细胞术:配合568 nm激光器标记抗体,检测细胞表面或胞内靶标,扩展同时检测通道数。橙色通道与FITC、PE、APC光谱分离度,补偿矩阵简洁,几乎无通道干扰。

超分辨显微成像:光物理特性适配dSTORM等单分子定位技术,提供高解析度细胞结构图像,是随机光学重建显微镜的理想选择。

免疫荧光与共聚焦成像:标记抗体后用于细胞内蛋白定位,pH 4-10信号稳定,从固定细胞到活细胞成像均可胜任。与DAPI、Cy3组合,三色共定位实验干净利落。

Western Blot荧光检测:标记一抗或二抗,替代传统HRP显色体系,实现多通道同时检测,灵敏度与特异性兼顾。

生物正交标记:与DBCO、叠氮等点击化学基团联用,构建靶向荧光探针,用于活细胞长时程示踪。

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(本篇图文信息由西安强化生物科技xw整理!本试剂仅限于科研实验用途!)

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