AZDye 532 活性酯，AZDye 532 NHS，种高性能的黄色荧光染料试剂

更新时间：2026-07-13

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基础参数

【中文名称】AZDye 532 琥珀酰亚胺酯 / AZDye 532 活性酯

【英文名称】AZDye 532 NHS / AZDye 532 NHS Ester / AZDye 532 SE / AZDye 532 OSu / AZDye 532 Succinimidyl Ester

【分子式】C₃₄H₃₃N₃O₁₁S₂

【分子量】约 723.77 g/mol

【产品纯度】≥95% (HPLC)

【外观性状】橙黄色固体粉末

【储存条件】-20℃避光干燥密封保存

【用途】蛋白质/抗体氨基标记、多色流式检测、细胞成像

【来源】西安强化生物科技

文章配图-1

产品介绍

AZDye 532 NHS Ester是一款专为532 nm倍频Nd:YAG激光线设计的黄色荧光NHS酯标记试剂。它以NHS活性酯形式提供，开瓶即可与含伯胺的生物分子直接反应——无需额外活化，无需催化剂，在弱碱性缓冲液中即完成高效共价偶联。

该染料在结构上与Alexa Fluor 532一致，吸收/发射光谱与DyLight 532、CF 532等磺化罗丹明核染料匹配。水溶性优异，pH 4至10范围内发射强度稳定，是多色流式实验中黄色通道的可靠选择。

作用机理

NHS酯基团在pH 7-9条件下与生物分子中的伯胺（蛋白质赖氨酸ε-氨基、N端α-氨基、胺基修饰寡核苷酸）发生亲核取代反应，生成稳定的酰胺键，同时释放N-羟基琥珀酰亚胺。

反应迅速、专一、副产物少。标记后的偶联物在532 nm激发下发射554 nm黄色荧光，量子产率约0.85，信号明亮且抗光漂白能力远优于FITC。

性能参数与竞品对比

AZDye 532 NHS Ester的核心优势集中在三个维度：

亮度：摩尔消光系数约81,000 cm⁻¹M⁻¹，量子产率~0.85，标记后信号强度显著高于同波段传统染料AMCA和Coumarin 343。

光稳定性：抗光漂白能力远超FITC，长时间成像或多轮流式扫描中信号衰减极小，适合需要反复检测的实验场景。

光谱兼容性：激发532 nm / 发射554 nm，与FITC（绿）、Cy5（红）光谱分离度好，多色实验中无需复杂补偿，通道干扰极低。

与AF532相比，AZDye 532性价比更优；与DyLight 532相比，光稳定性更突出；与磺化Cy3相比，分子量更小，标记后对蛋白活性影响更低。

应用领域

多色流式细胞术：配合532 nm激光器标记抗体，检测细胞表面或胞内靶标，扩展同时检测通道数。黄色通道与FITC、PE、APC几乎无光谱重叠，补偿矩阵简洁。

荧光成像与共定位：标记抗体或蛋白质，用于免疫荧光实验中的多靶标同时检测。pH 4-10发射稳定，从固定细胞到活细胞成像均可使用。

蛋白质相互作用研究：标记目标蛋白，通过FRET或共定位分析揭示蛋白间相互作用。高量子产率确保供体-受体配对中的信号强度。

HRP荧光双信号系统：AZDye 532标记辣根过氧化物酶，构建荧光-酶活双读出检测平台，提升免疫分析灵敏度。