Biotin-Ahx-LPETG-NH2，可用于低丰度蛋白-蛋白相互作用介绍

基础参数

【中文名称】生物素-氨基己酸-LPETG-氨，生物素Ahx-LPETG多肽酰胺

【英文名称】Biotin-Ahx-LPETG-NH2，Biotin-Aminohexanoyl-LPETG，Biotin-Ahx-LPETG-Amino

【产品纯度】≥95%

【分子量】854.02

【外观状态】白色或类白色冻干粉末

【储存条件】-20℃密封干燥避光，避免反复冻融与长时间暴露在高湿度环境中，防止肽键发生水解降解

【用途】科研级分选酶介导的蛋白定点生物素标记核心底物试剂

产品介绍

Biotin-Ahx-LPETG-NH2，Biotin-Aminohexanoyl-LPETG

Biotin-Ahx-LPETG-NH2是将生物素标记基团、6-氨基己酸亲水间隔臂与分选酶A特异性识别的LPETG多肽序列，以C端酰胺封端形式制备而成的特色多肽类科研试剂。它完整保留了LPETG序列对分选酶A的高特异性识别能力，同时依托生物素基团与链霉亲和素的超高亲和力，可在分选酶的介导下将生物素定点连接在靶标蛋白的N端或C端，C端酰胺封端结构避免了多肽C端游离羧基带来的非特异性副反应，是低背景蛋白定点生物素标记、高特异性蛋白相互作用富集、生物素化探针定点构建场景的核心工具试剂。

作用机理

Biotin-Ahx-LPETG-NH2分子中的LPETG多肽序列，可被金黄色葡萄球菌来源的分选酶A特异性识别，在钙离子辅助下，分选酶可特异性切割序列中苏氨酸与甘氨酸之间的肽键，将带有生物素标记的LPET片段共价转移到靶标蛋白末端的寡聚甘氨酸序列上，实现生物素基团在靶标蛋白特定位点的精准定点连接，避免传统随机生物素标记过程中蛋白活性位点被修饰导致的蛋白失活问题。分子中间的6-氨基己酸亲水间隔臂，大幅降低了生物素基团与多肽序列之间的空间位阻，既提升了分选酶对底物序列的识别效率，又保证了后续生物素基团与链霉亲和素的结合不受空间位阻干扰。C端的酰胺封端结构消除了多肽末端的游离羧基，避免了游离羧基在水相体系中与蛋白氨基发生非特异性交联的副反应，大幅降低了后续标记体系的非特异性背景。经过深度纯化去除短肽杂质后的试剂，几乎无游离生物素残留，后续标记反应中的非特异性生物素副标记占比极低。

性能参数与竞品对比

相较于传统Biotin-LPETG无间隔臂游离羧基底物试剂，该试剂引入的Ahx亲水间隔臂大幅降低了生物素基团带来的空间位阻，分选酶介导的标记反应转化率提升75%，C端酰胺封端结构消除了游离羧基的非特异性交联副反应，整体标记体系的非特异性背景降低80%。它的长期储存稳定性优异，在-20℃密封干燥避光条件下放置24个月，多肽序列完整性与生物素活性保留率仍高于94%，远高于普通C端游离羧基的LPETG多肽试剂，后者12个月内就会出现明显的肽键水解降解与非特异性副反应上升。和同类型其他品牌的Biotin-Ahx-LPETG-NH2产品相比，该试剂经过严格的去内毒素与去短肽杂质处理，后续标记得到的生物素化蛋白几乎无杂肽污染，无需额外的二次纯化即可直接用于后续的免疫共沉淀与亲和富集实验。

应用领域

可用于靶标蛋白的低背景位点特异性生物素标记，将该试剂与分选酶A、带有寡聚甘氨酸标签的靶标蛋白共孵育，在温和的生理缓冲条件下即可完成靶标蛋白特定位点的定点生物素标记，全程无化学交联剂参与，几乎不会破坏靶标蛋白的原有三维结构与生物活性，特别适用于活性酶、膜蛋白等对修饰位点敏感的蛋白的生物素化标记。可用于低丰度蛋白-蛋白相互作用的高特异性亲和富集，将该试剂通过分选酶介导定点标记在诱饵蛋白的特定位点，再使用链霉亲和素琼脂糖微球对生物素化诱饵蛋白及其结合的靶蛋白进行亲和富集，依托定点生物素标记的极低背景优势，富集产物中的非特异性杂蛋白占比远低于传统随机生物素标记体系，大幅提升后续质谱鉴定低丰度相互作用蛋白的结果准确性。

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