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Rhodamine B-Ahx-LPETGS,试剂助力科研人员精准追踪酶切反应介绍

更新时间:2026-09-07点击次数:61

基础参数

【中文名称】罗丹明B Ahx-LPETGS多肽,罗丹明B-Ahx-LPETGS,罗丹明B标记Sortase A底物多肽,罗丹明B标记转肽酶底物LPETGS

【英文名称】Rhodamine B-Ahx-LPETGS,RB-Ahx-LPETGS,Rhodamine B labeled LPETGS,Rhodamine B-Sortase A Substrate Peptide

【产品纯度】≥95%

【分子式】C59H82O14N9

分子量1141.14

【外观状态】亮玫红色冻干粉末

【储存条件】-20℃密封干燥避光,避免反复冻融与长时间强光直射,远离强氧化环境,防止罗丹明B荧光基团发生淬灭

【用途】科研级分选酶介导的蛋白定点橙红荧光标记核心底物试剂

产品介绍

Rhodamine B-Ahx-LPETGS,RB-Ahx-LPETGS

Rhodamine B-Ahx-LPETGS是将罗丹明B橙红荧光标记基团、6-氨基己酸亲水间隔臂与分选酶A特异性识别的LPETGS多肽序列共价连接制备而成的特色多肽类科研试剂。它完整保留了LPETGS序列对分选酶A的高特异性识别能力,同时依托罗丹明B基团在555 nm激光下的高亮度橙红荧光特性,可在分选酶的介导下将橙红荧光基团定点连接在靶标蛋白的N端或C端,全程不会破坏靶标蛋白的原有生物活性,是蛋白定点橙红荧光标记、多色荧光成像橙红通道标记、靶标蛋白亚细胞共定位示踪场景的核心工具试剂。

作用机理

Rhodamine B-Ahx-LPETGS分子中的LPETGS多肽序列,可被金黄色葡萄球菌来源的分选酶A特异性识别,在钙离子辅助下,分选酶可特异性切割序列中苏氨酸与甘氨酸之间的肽键,将带有罗丹明B荧光标记的LPET片段共价转移到靶标蛋白末端的寡聚甘氨酸序列上,实现橙红荧光基团在靶标蛋白特定位点的精准定点连接,避免传统随机罗丹明B标记过程中蛋白活性位点被修饰导致的蛋白失活问题。分子中间的6-氨基己酸亲水间隔臂,大幅降低了罗丹明B疏水荧光基团与多肽序列之间的空间位阻,既提升了分选酶对底物序列的识别效率,又保证了后续罗丹明B荧光基团的激发发射不受空间位阻干扰,荧光量子产率保留。经过深度纯化去除短肽杂质与游离罗丹明B后的试剂,几乎无游离荧光杂质残留,后续标记反应中的非特异性荧光背景占比极低。

性能参数与竞品对比

相较于传统Rhodamine B-LPETG无间隔臂底物试剂,该试剂引入的Ahx亲水间隔臂大幅降低了罗丹明B疏水荧光基团带来的空间位阻,分选酶介导的标记反应转化率提升68%,相同反应条件下的定点橙红荧光标记效率远高于无间隔臂的同类产品。它的长期储存稳定性优异,在-20℃密封干燥避光条件下放置20个月,多肽序列完整性与罗丹明B荧光亮度保留率仍高于93%,远高于普通随机合成的罗丹明B标记LPETGS多肽试剂,后者8个月内就会出现明显的肽键水解降解与荧光淬灭。和同类型其他品牌的Rhodamine B-Ahx-LPETGS产品相比,该试剂经过严格的去游离荧光杂质处理,后续标记得到的荧光化蛋白几乎无游离罗丹明B污染,无需额外的二次纯化即可直接用于后续的共聚焦成像实验,非特异性背景荧光占比降低72%。

应用领域

可用于靶标蛋白的位点特异性橙红荧光标记,将该试剂与分选酶A、带有寡聚甘氨酸标签的靶标蛋白共孵育,在温和的生理缓冲条件下即可完成靶标蛋白特定位点的定点橙红荧光标记,全程无化学交联剂参与,几乎不会破坏靶标蛋白的原有三维结构与生物活性,特别适用于信号蛋白、骨架蛋白等对修饰位点敏感的蛋白的荧光化标记。可用于多色荧光成像体系的橙红通道标记,依托定点标记的罗丹明B橙红荧光与DAPI蓝色通道、FITC绿色通道的光谱分离特性,在三色荧光成像体系中作为独立的第三通道使用,通道间几乎无荧光串色,大幅提升多色荧光共定位成像的结果准确性。也可用于靶标蛋白与细胞器的共定位示踪,将该试剂标记的靶标蛋白与绿色荧光标记的细胞器探针配合使用,通过双荧光通道的信号叠加,可精准判定靶标蛋白在不同细胞器中的分布定位,支撑细胞内蛋白转运路径的动态观测研究。

文章配图-1

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(本篇图文信息由西安强化生物科技xw整理!本试剂仅限于科研实验用途!)


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