Cy2DIGE NHS ester，Cy2DIGE NHS酯，通过稳定标记实现多样本精准定量分析

一.名称

英文名称：Cy2DIGE NHS ester；Cy2DIGE SE；Cy2DIGE Osu；Cy2DIGE Succinimidyl Ester

中文名称：Cy2DIGE NHS酯，Cy2DIGE 活性酯，Cy2DIGE 琥珀酰亚胺酯

分子量：677.5

激发波长 (Ex)：492nm

发射波长 (Em)：508nm

结构式：

二.产品形式

1.固体/粉末

2.溶于大部分有机溶剂，溶于水

3.端基取代率95%+

4.避免反复冻融，避光保存，储液应该立即使用，任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20°C。

三.产品介绍

Cy2DIGE NHS酯，即Cy2 NHS酯最小染料的等效产品，用于进行DIGE分析的蛋白质标记实验。该染料通常作为参照染料与Cy3DIGE和/或Cy5DIGE配合使用。这三种荧光染料专为精确比较两种或三种裂解液样本中的蛋白质表达而设计，其好的迁移率匹配特性与明亮的荧光信号，能够在二维凝胶电泳中实现微量蛋白质的高效检测与高分辨率分离。

Cy2DIGE NHS ester，分子量677.50 g/mol，属于花氰染料家族，是一种胺基反应性荧光探针，专为双向荧光差异凝胶电泳（2D-DIGE）设计。其激发波长最大值为492 nm，发射波长最大值为508 nm，位于绿色光谱区域。

反应化学机制

NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）酯是该分子的反应核心。在pH 7.2–8.5的水相缓冲液中（最佳pH为8.3–8.5），酯基与伯胺发生亲核酰基取代反应。蛋白质上的靶点为赖氨酸残基的ε-氨基和多肽链N端的α-氨基。伯胺的未质子化形式进攻酯的羰基碳，形成四面体中间体，随后塌缩并释放N-羟基琥珀酰亚胺，最终生成稳定的共价酰胺键。

该反应具有高度选择性：伯胺的亲核性远强于羟基或巯基，任何与羟基或巯基形成的酯或硫酯均不稳定，会迅速水解或被伯胺置换。因此标记过程干净、定量，副产物极少。

NHS酯的水解与胺基反应直接竞争。在pH 7.0、0°C条件下，水解半衰期约为4–5小时；在pH 8.6、4°C条件下，半衰期缩短至约10分钟。这种对pH的高度敏感性要求严格控制反应条件，并要求每次标记实验均现配现用——NHS酯类化合物在溶液中不具备长期稳定性。

四.相关试剂

Cy3 NHS ester

Cy5 NHS ester

Cy7 NHS ester

Cy2 NHS ester

Cy4 NHS ester

Cy5.5 NHS ester

Cy7.5 NHS ester

Alexa Fluor 488 NHS ester

Alexa Fluor 555 NHS ester

Alexa Fluor 594 NHS ester

Alexa Fluor 647 NHS ester

Alexa Fluor 680 NHS ester

Alexa Fluor 750 NHS ester

ATTO 488 NHS ester

ATTO 550 NHS ester

ATTO 590 NHS ester

ATTO 647N NHS ester

ATTO 655 NHS ester

ATTO 700 NHS ester

DyLight 488 NHS ester

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