Cy5DIGE NHS ester，支持三色同步标记，实现高分辨率差异蛋白分析

一.名称

英文名：Cy5DIGE NHS ester；Cy5DIGE SE；Cy5DIGE Osu；Cy5DIGE Succinimidyl Ester

中文名：Cy5DIGE 活性酯；Cy5DIGE 琥珀酰亚胺酯

分子量：616.19

Ex(nm)：651

Em(nm)：670

结构式：

二.产品形式

1.固体/粉末

2.溶于大部分有机溶剂，溶于水

3.端基取代率95%+

4.避免反复冻融，避光保存，储液应该立即使用，任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20°C。

三.产品介绍

Cy5DIGE NHS Ester，又称Cy5DIGE Succinimidyl Ester或Cy5DIGE SE，是Cy5荧光染料与N-羟基琥珀酰亚胺活性酯（NHS ester）的偶联物。其化学结构设计用于标记蛋白质的氨基基团（主要为赖氨酸残基），属于DIGE专用荧光探针，与Cy2DIGE、Cy3DIGE共同构成三色标记体系。

光谱特性

Cy5DIGE NHS Ester的激发波长为651 nm，发射波长为670 nm。该波长处于远红色光谱区域，生物组织在此区间的自发荧光极低，因此具有显著的高信噪比优势。其摩尔消光系数为250,000 L·mol⁻¹·cm⁻¹，量子 yield约为0.27至0.40。在260 nm处的校正因子为0.02，在280 nm处为0.03，这些参数对于后续F/P值计算至关重要。该染料的荧光对pH不敏感，适用范围为pH 3至10，可在宽泛的pH条件下稳定工作。

DIGE实验中的核心作用

双向荧光差异凝胶电泳（2D-DIGE）的核心逻辑是：将不同处理组的蛋白质样品分别用Cy2、Cy3、Cy5标记后，混合在同一块2D凝胶上电泳分离。Cy5DIGE NHS Ester作为第三种荧光颜色，与Cy2和Cy3配合使用，实现三组样品的同时定量比较。

Cy5DIGE的设计遵循"最小标记"（minimal labeling）策略：每个蛋白质分子仅标记一个荧光分子。这一策略确保标记后蛋白质的等电点和分子量变化极小，从而保证不同颜色标记的样品在凝胶中共迁移（co-migration），消除因迁移差异导致的定量误差。三种染料之间的光谱重叠极小，串扰（crosstalk）低，进一步降低了背景噪声。

四.相关试剂

Cy3 NHS ester

Cy5.5 NHS ester

Cy7 NHS ester

Alexa Fluor 488 NHS ester

Alexa Fluor 555 NHS ester

Alexa Fluor 594 NHS ester

Alexa Fluor 647 NHS ester

Alexa Fluor 680 NHS ester

ATTO 488 NHS ester

ATTO 550 NHS ester

ATTO 590 NHS ester

ATTO 647N NHS ester

ATTO 655 NHS ester

DyLight 488 NHS ester

DyLight 550 NHS ester

DyLight 650 NHS ester

DyLight 755 NHS ester

FITC NHS ester

TRITC NHS ester

Rhodamine B NHS ester

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