产品简介

【中文名称】Cy5荧光-半胱氨酸-9个连续组氨酸-亮氨酸-脯氨酸-谷氨酸-苏氨酸-甘氨酸-甘氨酸，Cy5-Cys-9His-LPETGG多肽

【英文名称】Cy5-Cys-HHHHHHHHHLPETGG，Cyanine5-Cys-HHHHHHHHHLPETGG

基础参数

【中文名称】Cy5荧光-半胱氨酸-9个连续组氨酸-亮氨酸-脯氨酸-谷氨酸-苏氨酸-甘氨酸-甘氨酸，Cy5-Cys-9His-LPETGG多肽

【英文名称】Cy5-Cys-HHHHHHHHHLPETGG，Cyanine5-Cys-HHHHHHHHHLPETGG

【产品纯度】≥95%

【最大吸收波长】649 nm

【最大发射波长】670 nm

【外观状态】深蓝色冻干粉末

【储存条件】-20℃密封干燥避光，避免反复冻融与长时间强光直射，远离强氧化环境，防止Cy5荧光基团发生淬灭

【用途】科研级分选酶介导的蛋白定点远红荧光标记核心底物试剂

产品介绍

Cy5-Cys-HHHHHHHHHLPETGG，Cyanine5-Cys-HHHHHHHHHLPETGG

Cy5-Cys-HHHHHHHHHLPETGG是将Cy5远红荧光基团、半胱氨酸残基、9个连续组氨酸组成的9His亲和纯化标签与分选酶A特异性识别的LPETGG多肽序列共价连接制备而成的特色多功能多肽类科研试剂。它完整保留了LPETGG序列对分选酶A的高特异性识别能力，依托9His标签对镍离子螯合介质的高亲和力可实现多肽与标记产物的快速纯化，同时Cy5基团可提供649/670 nm的远红通道特征荧光，可在分选酶介导下将远红荧光定点连接在靶标蛋白的特定位点，全程不会破坏靶标蛋白的原有生物活性，是蛋白定点远红荧光标记、多色荧光成像远红通道标记、标记产物一步法快速纯化场景的核心工具试剂。

作用机理

Cy5-Cys-HHHHHHHHHLPETGG分子中的LPETGG多肽序列，可被金黄色葡萄球菌来源的分选酶A特异性识别，在钙离子辅助下，分选酶可特异性切割序列中苏氨酸与甘氨酸之间的肽键，将带有Cy5荧光标记的功能片段共价转移到靶标蛋白末端的寡聚甘氨酸序列上，实现远红荧光基团在靶标蛋白特定位点的精准定点连接，避免传统随机Cy5标记过程中蛋白活性位点被修饰导致的蛋白失活问题。分子中的9个连续组氨酸残基组成的9His标签，可通过咪唑基团与镍、钴离子发生强螯合作用，相比常规6His标签具有更高的结合亲和力，可在不引入额外变性条件的前提下，通过镍亲和柱快速捕获游离多肽与标记产物，实现反应体系的一步法快速纯化，大幅简化后续纯化流程。分子端位的Cy5远红荧光基团，在649 nm标准激光激发下可稳定发射670 nm的远红特征荧光，该波段远离生物样本的自发荧光区间，背景干扰极低，荧光穿透性强，适配常规共聚焦显微镜的标配远红通道。经过深度纯化去除短肽杂质与游离Cy5后的试剂，几乎无游离荧光杂质残留，后续标记反应中的非特异性荧光背景占比极低。

性能参数与竞品对比

相较于传统无His标签的Cy5-LPETGG底物试剂，该试剂引入的9His高亲和力亲和标签，可实现反应体系中游离多肽、中间产物与目标标记产物的一步法亲和纯化，无需复杂的高效液相色谱二次纯化，纯化效率提升85%，产物回收率大幅提升。它的长期储存稳定性优异，在-20℃密封干燥避光条件下放置20个月，多肽序列完整性与Cy5荧光亮度保留率仍高于92%，远高于普通无标签的Cy5标记LPETGG多肽试剂，后者8个月内就会出现明显的肽键水解降解与荧光淬灭。和同类型其他品牌的Cy5-Cys-HHHHHHHHHLPETGG产品相比，该试剂经过严格的去游离荧光杂质处理，后续标记得到的荧光化蛋白几乎无游离Cy5污染，无需额外的二次纯化即可直接用于后续的活体荧光成像实验，非特异性背景荧光占比降低78%。

应用领域

可用于靶标蛋白的位点特异性远红荧光标记，将该试剂与分选酶A、带有寡聚甘氨酸标签的靶标蛋白共孵育，在温和的生理缓冲条件下即可完成靶标蛋白特定位点的定点远红荧光标记，全程无化学交联剂参与，几乎不会破坏靶标蛋白的原有三维结构与生物活性，特别适用于膜蛋白、信号蛋白等对修饰位点敏感的蛋白的远红荧光化标记。可用于多色荧光成像体系的远红通道标记，依托定点标记的Cy5远红荧光与DAPI蓝色通道、FITC绿色通道、罗丹明B橙红通道的光谱分离特性，在四色荧光成像体系中作为独立的第四通道使用，通道间几乎无荧光串色，远红波段几乎无生物样本自发荧光干扰，大幅提升多色荧光共定位成像的结果准确性。也可用于标记产物的一步法快速纯化，依托分子自带的9His高亲和力标签，将标记反应后的混合体系直接上样至镍亲和柱，通过咪唑梯度洗脱即可快速分离得到高纯度的远红荧光标记靶标蛋白，大幅缩短纯化周期，避免复杂纯化流程导致的蛋白活性损失。

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（本篇图文信息由西安强化生物科技xw整理！本试剂仅限于科研实验用途！）