JF549-LPETGG，靶标蛋白在活细胞内的长时间连续动态示踪 ，产品特点介绍

基础参数

【中文名称】JF549荧光标记LPETGG多肽，Janelia Fluor 549琥珀酰亚胺酯偶联型Sortase A底物多肽

【英文名称】JF549-LPETGG，JF549 NHS ester conjugation

【Ex / Em (nm)】549 / 571

【纯度】>95%

【外观性状】深橙红色固体粉末

【储存条件】-20℃以下冰冻、干燥、避光，分装为单次使用规格密封储存，避免频繁解冻，现配现用，全程保持干燥避光

【用途】科研级高性能橙红荧光Sortase A定点蛋白标记核心底物试剂

产品介绍

JF549-LPETGG，JF549 NHS ester conjugation

JF549-LPETGG是一款专为Sortase A定点蛋白荧光标记设计的高性能橙红色荧光多肽底物，它将JF549的优异549nm高抗淬灭橙红色荧光性能与LPETGG多肽的Sortase A特异性识别特性融合，是活细胞蛋白定点示踪、单分子成像的核心研究工具。该试剂可在Sortase A的介导下高效将JF549荧光定点偶联至带有寡聚甘氨酸标签的靶蛋白上，相比传统随机标记方法，定点标记效率提升70%以上，适配单分子水平长时间活细胞动态成像场景。

作用机理

JF549-LPETGG分子中的LPETGG核心多肽序列，可被Sortase A特异性识别，在生理中性缓冲条件下，Sortase A可精准切割苏氨酸与甘氨酸之间的肽键，将带有JF549荧光标记的功能片段高效共价转移到靶标蛋白末端的寡聚甘氨酸序列上，全程无剧烈化学反应参与，不会破坏靶标蛋白的原有生物活性。分子中的JF549荧光母核依托独特的刚性笼状分子结构设计，极大限制了分子内的旋转和振动，激发后能量几乎全部以荧光形式释放，非辐射耗散占比极低，即便与蛋白偶联后也不会轻易发生荧光淬灭，光稳定性远超传统Alexa Fluor 546、Cy3B等橙红通道荧光染料。同时JF549染料本身具备优异的细胞渗透性能，标记完成后的靶标蛋白可顺利进入活细胞内部，无需额外的透化处理即可完成活细胞内的成像观测。

性能参数与竞品对比

相较于传统普通荧光标记的LPETGG底物多肽，该试剂采用的JF549荧光母核依托刚性笼状结构设计，荧光量子产率与光稳定性实现了显著提升，长时间连续激光照射下的荧光抗淬灭能力是传统Cy3标记底物的3倍以上，适配单分子水平长时间活细胞动态成像场景。它的长期储存稳定性优异，-20℃以下密封干燥避光条件下放置24个月，多肽序列完整性与JF549荧光亮度保留率仍高于92%，远高于普通传统荧光标记的LPETGG多肽试剂，后者12个月内就会出现明显的肽键水解降解与荧光淬灭。和同类型其他品牌的JF549-LPETGG产品相比，该试剂经过严格的去游离JF549杂质处理，后续标记得到的荧光化蛋白几乎无游离荧光污染，无需额外二次纯化即可直接用于后续超分辨率成像实验。

应用领域

可用于Sortase A介导的靶标蛋白高性能定点橙红荧光标记，依托JF549的超高亮度与高光稳定性特性，在温和生理条件下即可完成靶标蛋白的位点特异性荧光修饰，产物均一度远高于传统随机标记方法，几乎不会破坏靶标蛋白的原有生物活性。可用于活细胞内靶标蛋白的长时间动态示踪成像，依托JF549优异的细胞渗透性与低背景荧光特性，无需额外透化处理即可实现靶标蛋白在活细胞内的长时间连续动态示踪，背景自发荧光干扰极低。可用于超分辨率显微镜（STED/STORM）的橙红通道标记，依托JF549染料的超高光稳定性与高亮度特性，适配超分辨率成像系统的长时间采集需求，获得纳米级分辨率的靶标蛋白精细分布图像。也可用于单分子水平的蛋白动态行为研究，依托JF549极低的荧光淬灭速率，可支撑长时间的单分子荧光追踪采集，获得连续的蛋白动态运动轨迹数据，支撑单分子成像相关的前沿基础科研实验。

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