AF546-Protein A/B，用于高分辨率亚细胞成像、低丰度靶标检测 ，产品介绍

基础参数

【中文名称】AF546标记的重组蛋白A/B，重组蛋白A/B, AF546偶联物，AF546偶联重组蛋白A/B

【英文名称】AF546-Protein A/B，AF546-Recombinant Protein A/B，Recombinant Protein A/B,AF546 conjugate

【产品纯度】≥95%

【最大吸收波长】546 nm

【最大发射波长】573 nm

【储存条件】2-8℃避光密封，避免反复冻融，添加0.02%叠氮钠作为抑菌剂

【用途】科研级高亮度橙红通道重组抗体结合荧光标记试剂

产品介绍

AF546-Protein A/B，AF546-Recombinant Protein A/B

AF546-Protein A/B是将序列优化后的重组蛋白A、蛋白B核心功能域融合，通过位点选择性偶联技术共价连接AF546高亮度橙红荧光基团制备的特色试剂。它完整保留了对十余种常见实验物种IgG Fc段的广谱高亲和力，同时通过基因编辑去除了天然蛋白的非特异性吸附位点，搭配AF546精准适配546 nm标准激光线的特性，可直接适配绝大多数共聚焦显微镜的专属橙红通道，在多色荧光体系中衔接绿、红通道，大幅降低相邻荧光基团的光谱串扰，是高分辨率亚细胞成像、低丰度靶标检测、多色流式Panel构建场景的高灵敏度特色工具试剂。

作用机理

AF546-Protein A/B的重组融合功能结构域，可精准锚定不同来源IgG分子Fc段的保守结合区域，全程不干扰抗体Fab端的抗原识别活性。通过蛋白表面非活性赖氨酸位点定点引入的AF546荧光基团，在546 nm专属激光激发下，可发射573 nm的高亮度橙红特征荧光，该波段常规532 nm与561 nm荧光通道之间的光谱空白，和AF488绿色荧光、AF594红色荧光的光谱重叠率低于4%，多色成像时几乎不需要复杂的信号补偿。经过序列优化的重组蛋白骨架，相比天然蛋白A/B的随机偶联产物，非特异性背景吸附降低84%，AF546染料的抗光漂白性能远超传统TRITC类染料，连续激光照射35分钟后荧光信号保留率仍高于86%。

性能参数与竞品对比

相较于传统TRITC标记的Protein A/B，该试剂的荧光亮度提升近1.5倍，且不受环境pH小幅波动的影响，在pH 6.0-9.0的宽体系中荧光强度无明显衰减，解决了TRITC易淬灭、背景高的痛点。它的长期储存稳定性优异，在2-8℃避光条件下放置12个月，抗体结合活性与荧光亮度几乎无衰减，远高于普通随机偶联的橙红荧光蛋白试剂，后者6个月内就会出现明显的染料聚集与活性下降。和同类型其他品牌的AF546-Protein A/B产品相比，该试剂的多物种IgG结合覆盖度提升28%，对部分低亲和力亚型IgG的捕获效率提升42%。

应用领域

可用于高分辨率共聚焦的精细亚结构成像，依托AF546的高亮度与高光稳定性，在拍摄细胞内微丝、囊泡等精细亚结构时，可支持长时间的逐层扫描与3D重构，全程无明显荧光淬灭，清晰呈现常规染料难以捕捉的纳米级细节。可用于低丰度膜蛋白的高灵敏度流式检测，利用橙红通道极低的自发背景，对细胞表面低表达的靶标蛋白进行染色时，阳性群与阴性群的信号分离度比普通Cy3标记试剂提升近1.2倍，能精准识别常规方法难以区分的弱表达亚群。也可用于多标免疫组化的同步显色，将该试剂与对应一抗配对，搭配AF488、AF647标记的其他靶标抗体，可在同一张组织切片上实现三个不同标志物的同步荧光显色，无需反复孵育不同二抗，大幅提升病理切片的多靶标检测效率。

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（本篇图文信息由西安强化生物科技xw整理！本试剂仅限于科研实验用途！）

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