AFDye 594 NHS Ester，属于磺化罗丹明类红色荧光活性染料

更新时间：2026-07-15

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基础参数

【中文名称】AFDye 594 琥珀酰亚胺酯、AFDye 594 活性酯

【英文名称】AFDye 594 NHS Ester、AFDye 594 SE、AFDye 594 Succinimidyl Ester、AFDye 594 Osu

【产品纯度】≥95%

【外观性状】固体

【储存条件】-20℃以下干燥、避光、防潮保存

【用途】试剂仅用于科研实验

【来源】西安强化生物科技

产品介绍

AFDye 594 NHS Ester是一种高亮度红色荧光胺反应性标记试剂，由Alexa Fluor 594荧光母核与N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS Ester）活性基团共价连接而成，光谱特性等同于Alexa Fluor® 594 NHS Ester。该试剂最大激发波长590–594 nm，最大发射波长613–617 nm，摩尔消光系数高达约92,000 cm⁻¹M⁻¹，具有的荧光量子产率。分子结构中的磺化亲水基团赋予其优异水溶性，可兼容水相与有机相反应体系。相较于传统Texas Red，AFDye 594在亮度、光稳定性和水溶性三个关键指标上均有明显提升，是Texas Red的理想升级替代方案。

作用机理

NHS酯基团在pH 7.5–8.5的弱碱性缓冲液中，与蛋白质、抗体、多肽表面的伯胺基团（赖氨酸ε-氨基或N端α-氨基）发生亲核取代反应，释放N-羟基琥珀酰亚胺，同时形成稳定的酰胺键共价连接。该反应选择性高，不与巯基、羟基或羧基发生交叉反应。标记后的生物分子在590–594 nm激发下发出明亮的橙红色荧光（613–617 nm），可被561 nm或594 nm激光谱线高效激发，适用于从免疫荧光到超分辨成像的多层次应用。需注意：NHS酯基对水分敏感，强烈推荐先用无水DMSO或DMF溶解配制母液，再加入反应体系，水溶液中极易水解为非活性游离酸。

性能参数与竞品对比

AFDye 594 NHS Ester的核心优势在于三个维度。与TRITC相比：光稳定性显著更优，在固定细胞中连续激光照射后信号衰减幅度极小，适合长时间共聚焦成像与反复扫描。与Cy3相比：亮度更高、水溶性更强，四磺酸结构确保染料不引起蛋白疏水化聚集沉淀，标记均一性远胜。与Texas Red相比：摩尔消光系数更高（92,000 vs ~70,000 cm⁻¹M⁻¹），pH耐受范围更宽（pH 4–10），且不易发生自聚集导致的荧光猝灭。红色荧光通道与AF488（绿色）、AF647（远红外）光谱分离良好，是三色乃至四色共定位实验的理想红色通道选择。

应用领域

该试剂应用方向成熟且覆盖面广：其一，免疫荧光与组织切片多色共定位，标记一抗或二抗用于共聚焦显微镜观察，橙红色荧光在神经组织或肿瘤切片中能清晰衬托目标蛋白，与AF488组合可实现双色共定位分析；其二，流式细胞术多色分析，作为第三或第四个颜色通道，与FITC、PE、APC等经典染料光谱分离良好，补偿矩阵简洁；其三，氨基修饰寡核苷酸标记，与5'-或3'-氨基修饰的DNA/RNA探针反应制备荧光探针，用于原位杂交、实时定量PCR及毛细管电泳；其四，纳米材料与脂质体功能化修饰，标记氨基化纳米颗粒或含氨基磷脂，用于荧光示踪与药物递送研究。