AFDye 488 NHS ester，AFDye 488 活性酯，一种高性能绿色荧光标记试剂

更新时间：2026-07-14

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基础参数

【中文名称】AFDye 488 活性酯；AFDye 488 琥珀酰亚胺酯

【英文名称】AFDye 488 NHS ester；AFDye 488 SE；AFDye 488 Osu；AFDye 488 Succinimidyl Ester

【分子式】C25H15Li2N3O13S22

【分子量】643.41

【产品纯度】≥95%

【外观性状】固体/粉末

【储存条件】-20℃以下冰冻、干燥、避光保存

【用途】试剂仅用于科研实验

【来源】西安强化生物科技

产品介绍

AFDye 488 NHS Ester是一种高性能绿色荧光标记试剂，由磺化呫吨类荧光染料AFDye 488与N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活性酯基团共价连接而成，光谱特性等同于Alexa Fluor® 488 NHS Ester。该试剂激发波长494 nm、发射波长517 nm，与488 nm氩离子激光器匹配，可在生理pH范围（pH 4-10）内保持稳定荧光输出，不受酸碱环境干扰。磺酸基团赋予分子优异水溶性，有效抑制聚集与非特异性吸附，可直接溶于水性缓冲液操作，无需引入有机溶剂，从根本上规避蛋白变性风险。

作用机理

NHS酯基团在pH 7.2-8.5的弱碱性条件下，与蛋白质、多肽、抗体表面的伯胺基团（赖氨酸ε-氨基或N端α-氨基）发生亲核取代反应，释放N-羟基琥珀酰亚胺，同时形成稳定的酰胺键共价连接。反应快速、选择性高，副产物无毒且易通过透析或凝胶过滤去除，不损伤生物分子的天然结构与活性。标记后的生物分子可被488 nm激光高效激发，发出明亮的绿色荧光，适用于从基础蛋白研究到超分辨成像的多层次应用。

性能参数与竞品对比

AFDye 488 NHS Ester的摩尔消光系数约71,000 cm⁻¹M⁻¹，荧光量子产率高，光稳定性显著优于传统FITC等绿色染料。与FITC相比：亮度更高、抗光漂白能力强数倍，适合长时间动态追踪；与Alexa Fluor® 488相比：光谱一致，性价比更优，且避免品牌溢价；与Cy3相比：激发波长更短（494 nm vs 550 nm），仪器兼容性更广，背景自发荧光更低。磺酸基团带来的水溶性优势使其在水性体系中标记均一性远超脂溶性NHS酯，尤其适合活细胞表面标记与流式多色分选场景。

应用领域

该试剂应用方向成熟且覆盖广泛：其一，免疫荧光与细胞成像，标记抗体用于IF、共聚焦及超分辨显微镜观察，高亮度与强光稳定性支持长时间多轮次扫描；其二，流式细胞术多色分析，与APC、AF647等远红外染料联用可实现四色至五色分选，光谱分离良好、补偿矩阵简洁；其三，荧光定量PCR，结合胺修饰寡核苷酸实现目标核酸的高灵敏度定量检测；其四，原位杂交与蛋白质相互作用研究，标记DNA/RNA探针进行基因定位，或通过FRET实验追踪分子间相互作用。