Ac-K(Cy5.5)-LPETGG，用于示踪Sortase A介导的蛋白定点标记反应介绍

基础参数

【中文名称】乙酰化-赖氨酸(Cy5.5荧光标记)-LPETGG多肽，N端乙酰化修饰Cy5.5标记Sortase A底物多肽

【英文名称】Ac-K(Cy5.5)-LPETGG，Cy5.5 NHS conjugation on lysine side chain

【Ex / Em (nm)】675 / 694

【纯度】>95%

【外观性状】深蓝紫色固体粉末

【储存条件】-20℃以下冰冻、干燥、避光，分装为单次使用规格密封储存，避免频繁解冻，现配现用，全程保持干燥避光

【用途】科研级近红荧光示踪Sortase A介导蛋白定点标记核心底物试剂

产品介绍

Ac-K(Cy5.5)-LPETGG，Cy5.5 NHS conjugation on lysine side chain

Ac-K(Cy5.5)-LPETGG是一款专为Sortase A介导靶标蛋白定点近红荧光标记设计的高性能底物多肽探针试剂。它将N端乙酰化修饰的LPETGG核心序列与赖氨酸侧链通过Cy5.5 NHS酯定点偶联得到的近红荧光母核融合，完整保留Sortase A转肽酶的高特异性识别活性，依托Cy5.5近红荧光信号，可直接示踪多肽与靶标蛋白的定点偶联全过程，无需额外显色步骤，是蛋白定点近红荧光标记相关科研实验的核心工具试剂。

作用机理

Ac-K(Cy5.5)-LPETGG分子中的LPETGG核心序列，可被Sortase A特异性识别，在生理中性缓冲条件下，Sortase A可精准切割苏氨酸与甘氨酸之间的肽键，将带有Cy5.5荧光标记的功能片段高效共价转移到靶标蛋白末端的寡聚甘氨酸序列上，全程无剧烈化学反应参与，不会破坏靶标蛋白的原有生物活性。分子N端的乙酰基封闭了多肽自身的游离氨基，消除了多肽自身的非特异性副反应，大幅提升Sortase A介导的定点标记产物均一度。分子中赖氨酸侧链通过Cy5.5 NHS酯定点偶联引入的Cy5.5近红荧光母核，适配675nm近红外标准激光线，在生理条件下荧光穿透性强，背景自发荧光干扰极低，可实现高信噪比的荧光信号采集。

性能参数与竞品对比

相较于传统未进行N端乙酰化修饰的K(Cy5.5)-LPETGG底物多肽，该试剂通过N端乙酰基封闭了多肽自身的游离氨基，消除了多肽自身的非特异性副反应，Sortase A介导的定点标记产物均一度大幅提升，杂标记产物占比降低90%以上。它的长期储存稳定性优异，-20℃以下密封干燥避光条件下放置18个月，多肽序列完整性与Cy5.5荧光亮度保留率仍高于91%，远高于普通未进行端基保护的Cy5.5标记LPETGG多肽试剂，后者12个月内就会出现明显的肽键水解降解与荧光淬灭。和同类型其他品牌的Ac-K(Cy5.5)-LPETGG产品相比，该试剂经过严格的去游离Cy5.5 NHS酯杂质处理，后续标记得到的荧光化蛋白几乎无游离荧光污染，无需额外二次纯化即可直接用于后续近红成像实验。

应用领域

可用于近红荧光示踪Sortase A介导的蛋白定点标记反应，依托Cy5.5的高亮度近红荧光特性，可直接通过近红外荧光检测快速定量评估Sortase A的酶切反应转化率，大幅简化酶活检测流程。可用于活细胞内靶标蛋白的近红荧光定点示踪成像，依托定点标记的高均一度与Cy5.5的低背景荧光特性，实现靶标蛋白在活细胞内的深层动态示踪，背景自发荧光干扰极低。可用于Sortase A酶活的高通量近红荧光检测筛选，将该试剂作为通用底物，适配多孔板高通量检测体系，依托近红通道低背景特性大幅提升检测灵敏度。也可用于多色荧光成像体系中的近红通道标记，依托该试剂标记得到的高均一度荧光化蛋白，可与其他不同发射波长的荧光标记蛋白搭配，构建多通道无串扰的多色荧光成像体系，支撑蛋白互作相关的基础科研实验。

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